1. pcr扩增仪反应板
PCR反应的原理由变性→退火→延伸三个基本反应。
①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备。
②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。
③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。
重复循环变性→退火→延伸三过程就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。
2. pcr扩增仪反应体系
随着分子生物技术发展和pcr技术的广泛应用，一些生物技术服务公司提供的产品与服务越来越简单高效和人性化。pcr试剂盒的mix体系就是其中一个，其中mix就是浓缩2～5x的最佳反应体系，其中包括浓缩的反应缓冲液，聚合酶，mg2+，dNTPS。客户仅仅需要加入模板，引物和补足水分就可以开始进行pcr。
3. pcr扩增仪反应板机座的清洁应使用
现在pcr仪都是热盖设计，pcr过程中热盖可以有效防止冷热循环导致的水分挥发与凝结现象，维持pcr扩增系统的稳定。如果没有盖盖子进行pcr，则反应体系的水分会蒸发并冷凝在盖子上，而反应系统浓度越来越高，乃至干燥。这样最后基本没有扩增，pcr失败。
4. pcr扩增仪使用
1、在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2、调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，最后在72℃ 保温7min。
3、结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4、PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
5. pcr扩增仪反应板基座的清洁应使用无水乙醇
模板的取材主要依据PCR的扩增对象，可以是病原体标本如病毒、细菌、真菌等。也可以是病理生理标本如细胞、血液、羊水细胞等。法医学标本有血斑、精斑、毛发等。
标本处理的基本要求是除去杂质，并部分纯化标本中的核酸。多数样品需要经过SDS和蛋白酶K处理。难以破碎的细菌，可用溶菌酶加EDTA处理。所得到的粗制DNA，经酚、氯仿抽提纯化，再用乙醇沉淀后用作PCR反应模板
6. pcr扩增仪反应板制作的清洁应使用
用我自己的话说，就是pcr扩增仪是普通的pcr反应，反应后产物一般通过电泳查看结果。实时荧光pcr即real-timepcr，是在反应体系中加入目的基因的探针，pcr过程中，根据目标基因的表达量多少，探针可发荧光，rt-pcr仪通过检测荧光表达量来记录基因表达量，从而达到了同不定量检测基因表达量，不需要电泳辅助。
如果一步pcr反应即可达到目标就直接用实时荧光pcr即可快速检测，如果你的pcr反应需要两步（如巢式pcr），第一步可以用普通pcr扩增仪，当然第一步也可以用实时荧光pcr，不放探针就行了，你不觉得这有点奢侈吗......
价格，那得看哪产的了......一部进口的普通pcr可以比国产的rt-pcr贵很多。仪器也需要休息，我学校的一台普通扩增仪几乎一天用20个小时，到最后每天都会出问题，你舍得用进口的rt-pcr干这个嘛？pcr一页可以说一分钱一分货，举一个例子，进口的pcr有的可以将温度精确到0.1度，而且变温速度也很重要，关键是看你做的实验是否需要这么精确，是否需要进口高端级别的pcr
7. pcr扩增仪反应板怎么用
1. 试剂准备阶段
试剂准备是 PCR 操作的第一个流程，需要在试剂贮存和准备区的超净工作台或生物安全柜进行，用确保无污染的移液器、枪头及容器等进行分装。所有的 PCR 体系都应该在 -20℃ 保存，除了 ddH2O 之外，其余的试剂组份需完全融化之后再加入，以免影响浓度。配制反应体系应在快速进行，以减少非特异性扩增。体系配制完成之后应马上进行 PCR 反应。
2. 样本制备阶段
样本制备是整个 PCR 反应中最为关键的环节，在接收样本时一定要确保样本的密封性以及样本编号的唯一性。严格遵守操作规程进行加样操作，操作时候尽量少说话或者不说话。
所有操作需要在生物安全柜内进行，操作前后生物安全柜需要进行紫外灯消毒，注意生物安全柜中物品的排放。戴手套并勤于更换，要有「无核酸观念」 。
3. 核酸扩增
在核酸扩增环节需要选择质量好的 Ep 管，装入反应体系的 EP 管上机前混匀、离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部。在样本检测的同时设立对照（阳性对照、阴性对照、阴性模板、试剂对照）。同时严密检测 PCR 扩增仪的各项性能指标，其中对 PCR 扩增仪而言温度控制就意味着质量。
4. 产物分析
常见问题：
1）无 CT 值出现：模板量不足（杂质的引入及反复冻融的情况等）
2）CT 值出现过晚（大于 38）：各种反应成分的降解或加样量的不足
3）标准曲线线性相关性不佳：加样误差、标准品出现降解等
4）阴性对照有信号：模板有基因组的污染
5）扩增效率低：反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解、反应抑制
6）扩增曲线的异常：模板的浓度太高或荧光染料的降解
8. pcr扩展仪
PCR荧光滤光片（替代进口）FAM，HEX，ROX，CY5，CY5.5，CY3-2021新版
瑞研光学研发推出替代进口PCR荧光滤光片组
PCR荧光滤光片（替代进口）
聚合酶链式反应Polymerase Chain Reaction PCR
FAM，HEX，ROX，CY5（常规）
CY5.5，CY3（扩展）
瑞研光学根据PCR仪器及荧光检测研发的优质PCR滤光片套组，为PCR设备提供关键的滤光元件，为解决我国对进口荧光滤光片组的依赖，提供的可替代解决方案。
9. pcr扩增仪反应板基底座的清洁应使用
作用10 min 后用清水擦拭工作台面，以防止消毒液残留抑制实验结果。但在使用紫外线照射消毒时应注意延长消毒时间。因为紫外线清除实验室的核酸源污染效果并不理想。
从理论上讲，紫外线只能诱导核酸中的嘧啶产生二聚体，并不能使核酸降解或断裂。
经紫外线照射后的核酸片段仍然存在，即使核酸片段中的部分嘧啶形成二聚体，但只要不在基因扩增引物引发附近，经紫外线照射后的核酸片段仍然会得到扩增或部分扩增。
因此，在使用紫外线照射方法时，应使灯管距离工作区的距离在60-90cm，并延长照射时间，最好照射过夜。